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详细分析组织细胞固定液的使用方法

发布日期:2021-12-21           信息来源:盐城溢之源生物科技有限公司

组织经一系列的处理后,就必须进行固定,当然有的组织是先固定,再进行处理,然后再固定。固定的作用,从组织学的角度其简单的定义是,保持细胞、组织的固有形态和结构,使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构,而从免疫组化技术的角度,固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固,尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应;防止细胞的自溶,以免使抗原扩散至组织间质;以保持组织的固有形态和结构;更重要的是保持组织或细胞的抗原性,不但要使抗原不导致失活,而且不使抗原发生弥散的现象,才能在免疫组化染色时,不产生过深的背景,影响对阳性物的判断。

组织细胞固定液的使用说明:
1、对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入1毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定10-20分钟即可,但固定较长时间,例如1-2小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。
2、对组织切片,加入4%多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定10-20分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如1-2 小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。
3、对于组织块样品,浸泡入4%多聚甲醛固定液中,室温或4℃浸泡固定2-24小时。建议不超过8小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每15-30分钟换一次,共6-8次,建议在摇床进行,或用流水冲洗1-2小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入70-75%的酒精中保存。

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